Extracción en Fase Sólida SPE

La extracción en fase sólida (SPE) es una técnica de preparación de muestras utilizada para la purificación, concentración y aislamiento de analitos antes de su análisis mediante HPLC, GC u otras técnicas instrumentales. El proceso se basa en la adsorción selectiva de los compuestos sobre un sorbente sólido seguido de su posterior elución con un solvente adecuado.

Características generales de los cartuchos SPE

Construcción

• Cuerpo fabricado en polipropileno de alta pureza.
• Dos frits de polietileno de 20 µm.
• Conexión tipo Luer.
• Compatibles con jeringas, matraces de filtración y manifolds de vacío.

Características del sorbente de sílica

• Sílica de forma irregular.
• Tamaño medio de partícula: 50 µm.
• Diámetro de poro: 60 Å.
• Distribución granulométrica controlada.
• Ausencia de partículas finas para minimizar contaminación de la muestra.

Volúmenes disponibles

• 1 mL.
• 3 mL.
• 6 mL.
• 12 mL.

Cantidad de sorbente

• Desde 100 mg hasta 2000 mg según el formato.

Fases SPE de fase reversa

C18

Características:

• Fase más hidrofóbica.
• Octadecilsilano polimérico endcapped.
• Carga de carbono: 17 %.
• Mecanismo de retención: fase reversa.

Aplicaciones:

• Fármacos en plasma, suero y orina.
• Desalinización de péptidos.
• Ácidos orgánicos en vino.
• Pesticidas en agua.

C8

Características:

• Octilsilano endcapped.
• Carga de carbono: 8,5 %.
• Menor retención que C18.

Aplicaciones:

• Compuestos excesivamente retenidos en C18.

C2

Características:

• Etilsilano endcapped.
• Carga de carbono: 5,5 %.

Aplicaciones:

• Antiepilépticos en plasma.

Fenilo (PH)

Características:

• Fase reversa con grupos fenilo.
• Carga de carbono: 3,8 %.

Aplicaciones:

• Compuestos altamente aromáticos.

Fases SPE de fase normal

Sílica

Características:

• Sílica sin modificar.
• Tamaño de partícula: 50 µm.
• Poro: 60 Å.

Aplicaciones:

• Clasificación de lípidos.
• Pigmentos vegetales.
• Vitaminas liposolubles.
• Limpieza de extractos de pesticidas.

CN (Cianopropilo)

Características:

• Carga de carbono: 4 %.
• Endcapped.
• Mecanismo de fase normal moderadamente polar.

Aplicaciones:

• Drogas y metabolitos.
• Analitos en matrices acuosas y orgánicas.

NH₂ (Aminopropilo)

Características:

• No endcapped.
• Carga de carbono: 5 %.
• Intercambio aniónico débil y fase normal.

Aplicaciones:

• Compuestos polares en matrices no polares.

Diol

Características:

• Dos grupos hidroxilo.
• Carga de carbono: 6 %.

Aplicaciones:

• Fármacos y metabolitos.
• Extracciones de compuestos polares.

Florisil®

Características:

• Silicato de magnesio.
• Tamaños de partícula:
  • 75-100 µm.
  • 100-200 µm.
• Poro: 85 Å.

Aplicaciones:

• Pesticidas en alimentos.
• PCB en aceites dieléctricos.
• Limpieza de extractos de suelo y alimentos.

Fases de intercambio iónico

SAX (Strong Anion Exchange)

Características:

• Grupo funcional: amonio cuaternario.
• Contraión acetato.
• Intercambio aniónico fuerte.

Aplicaciones:

• Retención de compuestos con carga negativa.

SCX (Strong Cation Exchange)

Características:

• Grupo funcional: ácido sulfónico.
• Capacidad de intercambio: 0,24 meq/100 mg.
• Intercambio catiónico fuerte.

Aplicaciones:

• Retención de compuestos con carga positiva.

Sorbentes poliméricos OA™

OA™ HLB

Características:

• Copolímero hidrofílico-lipofílico balanceado.
• Tamaño de partícula: 40 µm.
• Área superficial: 850 m²/g.
• Poro: 110 Å.
• Estabilidad de pH: 0-14.

Aplicaciones:

• Fármacos y metabolitos.
• Aguas residuales y potables.
• PAHs.
• Herbicidas y pesticidas.
• Antibióticos.

OA™ DVB

Características:

• Copolímero poliestireno-divinilbenceno.
• Alta hidrofobicidad.
• Área superficial: 1000 m²/g.
• Tamaño de partícula: 85 µm.
• Estabilidad de pH: 0-14.

Aplicaciones:

• Compuestos neutros, ácidos y básicos.
• Matrices viscosas.
• Muestras ambientales.

OA™ SCX

Características:

• Intercambio catiónico fuerte.
• Capacidad iónica: 0,85 meq/g.
• Área superficial: 800 m²/g.
• Tamaño de partícula: 85 µm.
• Estabilidad de pH: 0-14.

Aplicaciones:

• Fármacos básicos.
• Metabolitos.
• Pesticidas.
• Melamina.

OA™ SAX

Características:

• Intercambio aniónico fuerte.
• Capacidad iónica: 0,25 meq/g.
• Área superficial: 900 m²/g.
• Estabilidad de pH: 1-14.

Aplicaciones:

• Compuestos ácidos.
• Fenoles ácidos.
• Herbicidas ácidos.

OA™ WCX

Características:

• Intercambio catiónico débil.
• Capacidad iónica: 0,70 meq/g.
• Área superficial: 800 m²/g.
• Estabilidad de pH: 0-14.

Aplicaciones:

• Bases fuertes (pKa >10).
• Estreptomicina.
• Fluidos biológicos.

OA™ WAX

Características:

• Intercambio aniónico débil.
• Capacidad iónica: 0,50 meq/g.
• Área superficial: 800 m²/g.
• Estabilidad de pH: 1-14.

Aplicaciones:

• Ácidos fuertes (pKa <2).
• Fármacos.
• Antibióticos.
• Pesticidas.
• Análisis ambiental.

Formato de placas SPE de 96 posiciones

Características:

• Configuración de 96 pocillos.
• Fase C18 endcapped.
• Carga de carbono: 17 %.
• Tamaño de partícula: 50 µm.
• Poro: 60 Å.
• Capacidades:
  • 10 mg.
  • 20 mg.
  • 30 mg.
  • 60 mg.
  • 100 mg por pocillo.

Procedimiento general SPE

Acondicionamiento

• Activación del sorbente mediante solventes adecuados.
• Evitar el secado del lecho antes de cargar la muestra.

Aplicación de muestra

• Flujo típico entre 1 y 5 mL/min según el formato.
• Máxima interacción entre analito y sorbente.

Lavado

• Eliminación de interferencias débilmente retenidas.
• Utilización de solventes de fuerza de elución controlada.

Elución

• Recuperación del analito mediante solvente de mayor fuerza de elución.
• Volúmenes típicos de 1 a 2 mL.

Capacidad de retención

Como referencia general, los sorbentes basados en sílica de 60 Å retienen aproximadamente un 1 % de su peso en analitos con afinidad por la fase. Por ejemplo:

• Lecho de 200 mg → capacidad aproximada de 2 mg de compuestos retenidos.

La capacidad real depende de:

• Tipo de matriz.
• Naturaleza del analito.
• Competencia con otros compuestos presentes en la muestra.
• Afinidad química del sorbente utilizado.